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免疫磁珠法(简称“磁珠法”)是一种简单快速分离外泌体的方法，适合于外泌体的常觑分离和分析，基于针对外泌体膜表面的特征性蛋白设计的。外泌体表面有其特异性标记物(如CD63、CD9蛋白)，用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合，即可将外泌体吸附并分离出来。另外，西安干细胞公司该方法证明利用磁珠共沉淀下来的不只是外泌体，还有一些可溶性蛋白，提示我们再进行外泌体蛋白质组学的分析时需要考虑可溶性蛋白的干扰。磁珠法的优点是不依赖于超高速离心机，在普通实验室即可完成；操作简单，特异性高；可以用流式直接分析，能快速获得外泌体不同亚型的分布情况，不影响外泌体形态完整等优点，但是效率低，外泌体生物活性易受pH和盐浓度影响，不利于下游实验。通常会利用超度离心或者密度梯度法分离得到总的外泌体，西安干细胞公司进一步用磁珠法分离表面标志物不同的外泌体亚型。具体操作步骤如下：
1.将条件培养基收集到50m离心管中,2000×g,4℃，离心10分钟。
2.转移上清到新的离心管中，重复上一步。
3.按照包被好抗体的磁珠的使用说明进行操作(例如：用含有3mg/ mI bsa的PBS洗5次，每次5ml)，利用磁铁进行分离。
4.利用磁铁对磁珠进行富集，并且去除上清，加入步骤2中所获得的条件培养基并重悬磁珠。
5.将管子固定到旋转摇床上室温或者4℃孵育24小时，使外泌体膜上的蛋白和磁珠上对应的抗体充分结合。
6.用磁铁富集磁珠，用2~10 mI PBs(含3mg/mBSA)洗磁珠，至少3次，以减少非特异性结合。
7.用不含BSA的PBS洗1次，以减少BSA的丰度。
8.用100μlPBS重悬磁珠，下游可进行FACS分析或者用密度梯度法进一步纯化，西安干细胞公司也可直接用SDs样品缓冲液处理后进行免疫印迹分析，或者固定后进行电镜检测。
