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【西安脐带干细胞存储】脐带间充质干细胞制备基本器材和试剂

2023-09-11 14:51:09


1.设备超净工作台、倒置照相显微镜、相差显微镜、荧光显微镜、解剖显微镜、共聚焦显微镜、电子显微镜、CO2培养箱、低速大容量多管离心机、普通冰箱、超低温冰箱、程序降温系统、制冰机、酶标仪、染色体分析系统、细胞计数仪、PCR仪、基因测序系统、凝胶成像系统、超滤系统、西安脐带干细胞存储纯水系统、PH计、电子称、平衡称或天平、高速离心机、高压蒸气消毒装置、点热干燥箱、恒温水浴箱、微孔过滤器、移液器(1~1000u)。

2.消耗材料T175塑料培养瓶、T75塑料培养瓶、T25培养瓶、培养皿、塑料离心管(5ml、1oml、2oml、5oml、l0m、250ml)、EP管、细胞冻存管、一次性移液管、移液器枪头、乳胶手套、吸球、酒精灯、小型手术包(剪刀、镊子、眼科剪、眼科镊、止血钳、刀片等)、纱布、棉球、搪磁盘、杂物缸等。进入细胞工程实验室的所有耗材必须是无菌的合格产品。

3.基本主要试剂DMEM/F12培养基、西安脐带干细胞存储EDTA-025%胰酶、 NaHCo3、胎牛血清(FBs)青霉素(80万U)链霉素(00万U)表皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、干细胞生长因子、去离子无菌水、生理盐水、人血白蛋白、复方电解质冻存液、酒精、消毒液、pH试纸。进入细胞工程实验室的所有耗材必须是无菌的合格产品。

西安脐带干细胞存储

基础试剂的准备:

(1)66% NaHCO3溶液的配制:用电子天平称取 NaHco366,。加灭菌注射用水定容至100m,在细胞层流室内超净工作台上用高压灭菌过的0.22um的滤膜过滤除菌后备用。

(2)10%FBS的DMEM-F12培养液的配制:无菌条件下在500基础DMEM-F12培养液中加入5m胎牛血清,再用66% NaHCo2溶液调节pH值至74后备用。

(3)抗生素的配置:将青霉素(80万U/瓶)溶解于4ml灭菌注射用水中,西安脐带干细胞存储链霉素(100万U瓶)溶解于4ml灭菌注射用水中,两者混匀后按照1m/支分装备用,使用时每升培养液加入1ml。

(4)冻存液:含20%FBS和含10%DMSO的完全DMEM-F12培养液。


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